低速离心机是实验室中分离液体混合物(如细胞沉淀、组织匀浆)的常用设备,正确操作需结合转速、时间与转子类型三要素,以确保分离效果并避免设备损坏。以下是具体指南:
一、转速选择:平衡分离需求与样品安全
根据样品类型设定转速
细胞沉淀:通常选择800-1500×g(相对离心力),如分离哺乳动物细胞(如HeLa细胞)时,1000×g离心5分钟即可使细胞沉降至管底。
组织碎片:需更高转速(2000-3000×g),例如分离肝脏匀浆中的细胞核时,2500×g离心10分钟可有效沉淀大颗粒碎片。
轻质颗粒(如外泌体):需低速(500-800×g)结合长时间离心,避免颗粒破裂。
避免超速运行
低速离心机转子设计有最大转速限制(如4000rpm对应约2000×g),超速可能导致转子变形或破裂。使用前需核对转子铭牌标注的最大转速(RCF),而非仅参考电机转速(rpm)。
二、时间设定:匹配转速与分离目标
短时间离心(1-5分钟):适用于快速沉淀大颗粒(如血细胞、酵母细胞),但可能残留细小碎片。
长时间离心(10-30分钟):用于分离微小颗粒(如病毒颗粒、细胞器)或需高纯度沉淀的场景。
梯度离心优化:若需分离不同密度组分(如密度梯度离心法分离细胞器),需分阶段设定转速与时间(如先低速离心去除大碎片,再高速离心分离目标组分)。
三、转子选择:适配样品量与容器类型
固定角转子:适用于高容量样品(如50mL离心管),但沉淀颗粒集中于管底侧壁,需调整取样位置。
水平转子(摆桶转子):沉淀颗粒均匀分布于管底,适合需要平铺沉淀的场景(如DNA提取后的乙醇沉淀)。
微量离心转子:适配0.2mL或1.5mL离心管,用于小体积样品(如PCR反应液)的快速分离。
四、操作注意事项
对称平衡:离心管需按转子要求对称放置,质量误差不超过0.1g,避免振动损坏设备。
盖紧管盖:防止离心过程中液体泄漏腐蚀转子或电机。
预冷处理:若需低温离心(如4℃分离蛋白质),提前将转子与离心管置于冰箱预冷。
降速停止:离心结束后等待转子自然停止,勿强行制动,防止样品重新悬浮。
总结:低速离心机的科学使用需结合样品特性(颗粒大小、密度)、分离目标(纯度、回收率)及转子类型综合决策。建议通过预实验优化转速-时间组合,并严格遵循设备说明书中的转速与转子匹配要求,以确保实验结果可靠性与设备安全性。